Mikrobioen kultura-euskarri arrunten sarrera (I)
Kultura-euskarria hainbat substantziatik artifizialki prestatutako nutriente-matrize mota bat da, hainbat mikroorganismo hazkuntzaren beharren arabera, zeina hainbat mikroorganismo hazteko edo bereizteko erabiltzen dena.Beraz, nutriente-matrizeak elikagaiak (karbono iturria, nitrogeno iturria, energia, gatz ez-organikoa, hazkuntza-faktoreak) eta mikroorganismoek erabil ditzaketen ura izan behar ditu.Mikroorganismo motaren eta esperimentuaren helburuaren arabera, hainbat mota eta prestaketa metodo daude laborantza-euskarrien.
Esperimentuan ohiko kultura-euskarri batzuk honela sartzen dira:
Agar-erdiko nutrizionala:
Mantenugai-agar-eremua bakterio arrunten hedapen eta hazkuntzarako, bakterio-zenbaketa osoa zehazteko, bakterio-espezieak kontserbatzeko eta kultura purua egiteko erabiltzen da.Osagai nagusiak hauek dira: behi-estraktua, legamia-estraktua, peptona, sodio kloruroa, agar-hautsa, ur destilatua.Peptona eta behi-hautsak nitrogenoa, bitamina, aminoazidoa eta karbono iturriak eskaintzen ditu, sodio kloruroak presio osmotiko orekatua mantendu dezake eta agar-a kultura-euskarriaren koagulatzailea da.
Nutrizio-agar hazkuntza-euskarri mota oinarrizkoena da, mikrobioen hazkuntzarako beharrezkoak diren mantenugai gehienak dituena.Agar nutrizionala ohiko bakterioen hazkuntzarako erabil daiteke.
Odol agar ertaina:
Odol agar ertaina animalien odol desfibrinizatua (oro har untxi odola edo ardi odola) duen behi-estraktuaren peptona medio mota bat da.Hori dela eta, bakterioak lantzeko beharrezkoak diren hainbat mantenugaiez gain, koentzima (adibidez, V faktorea), hemo (X faktorea) eta beste hazkuntza-faktore berezi batzuk ere eman ditzake.Hori dela eta, elikadurarako eskatzen duten zenbait mikroorganismo patogeno landu, isolatu eta kontserbatzeko erabili ohi da hemokultura-medioa.
Gainera, odol agar hemolisia probarako erabiltzen da normalean.Hazkunde prozesuan, bakterio batzuek hemolisina sor dezakete globulu gorriak hautsi eta disolbatzeko.Odol plakan hazten direnean, eraztun hemolitiko gardenak edo zeharrargiak ikus daitezke koloniaren inguruan.Bakterio askoren patogenizitatea ezaugarri hemolitikoekin lotuta dago.Bakterio ezberdinek ekoizten duten hemolisina desberdina denez, gaitasun hemolitikoa ere desberdina da, eta odol-plakaren hemolisi-fenomenoa ere desberdina da.Hori dela eta, hemolisi proba askotan bakterioak identifikatzeko erabiltzen da.
TCBS bitartekoa:
TCBS tiosulfato zitrato behazun gatz sakarosa agar erdia da.Vibrio patogenoaren isolamendu selektiborako.Peptona eta legamia-estraktua hazteko oinarrizko mantenugai gisa erabiltzen dira nitrogeno iturria, karbono iturria, bitaminak eta bakterioak hazteko beharrezkoak diren beste hazkuntza-faktore batzuk emateko;Sodio kloruroaren kontzentrazio handiagoak vibrioaren hazkunde halofilikoaren beharrak ase ditzake;Sakarosa karbono-iturri hartzigarri gisa;Sodio zitratoak, pH handiko ingurune alkalinoak eta sodio tiosulfatoak hesteetako bakterioen hazkuntza inhibitzen dute.Behien behazun-hautsak eta sodio tiosulfatoak bakterio gram-positiboen hazkuntza inhibitzen dute batez ere.Horrez gain, sodio tiosulfatoak sufre iturri bat ere eskaintzen du.Zitrato ferikoaren presentzian, bakterioek hidrogeno sulfuroa hauteman dezakete.Hidrogeno sulfuroa sortzen duten bakterioak badaude, sedimentu beltza sortuko da plakan;TCBS medioaren adierazleak bromokresol urdina eta timol urdina dira, azido basearen adierazleak.Bromokresol urdina azido-base adierazlea da 3,8 (horia) eta 5,4 (urdin-berdea) arteko pH-aldaketarekin.Bi kolore-tarte daude: (1) azido-tartea pH 1,2 ~ 2,8 da, horitik gorrira aldatzen da;(2) Alkali sorta pH 8,0 ~ 9,6 da, horitik urdinera aldatzen da.
TSA gazta soja peptona agar ertaina:
TSAren konposizioa agar nutrientearen antzekoa da.Estandar nazionalean, normalean, farmazia industriako gela garbietan (eremuetan) finkatze bakterioak probatzeko erabiltzen da.Aukeratu proba-puntua probatu beharreko eremuan, ireki TSA plaka eta jarri proba-puntuan.Laginak airean 30 minutu baino gehiagoz denbora desberdinetan hartu behar dira, eta gero hazi egingo dira koloniak zenbatzeko.Garbitasun-maila desberdinek kolonia-zenbaketa desberdinak behar dituzte.
Mueller Hinton agar:
MH medioa mikroorganismoek antibiotikoekiko duten erresistentzia detektatzeko erabiltzen den mikrobio-euskarria da.Mikroorganismo gehienak hazten diren euskarri ez hautagarria da.Gainera, osagaietako almidoiak bakterioek askatzen dituzten toxinak xurga ditzake, beraz, ez du eraginik izango antibiotikoen funtzionamenduaren emaitzetan.MH medioaren konposizioa nahiko soltea da, eta horrek antibiotikoen hedapenari laguntzen dio, hazkundearen inhibizio-eremu nabaria izan dezan.Txinako osasun-industrian, MH bitartekoa droga-sentsibilitate probarako ere erabiltzen da.Bakterio berezi batzuen sendagaien sentsibilitate-proba egitean, adibidez, Streptococcus pneumoniae, ardi-odola % 5 eta NAD gehi daitezke medioari nutrizio-baldintza desberdinak betetzeko.
SS agar:
SS agar Salmonella eta Shigella isolamendu selektiborako eta hazkuntzarako erabili ohi da.Bakterio gram-positiboak, koliforme gehienak eta proteusak inhibitzen ditu, baina ez du salmonelaren hazkuntzan eragiten;Sodio tiosulfatoa eta zitrato ferrikoa erabiltzen dira hidrogeno sulfuroaren sorrera detektatzeko, kolonia-zentroa beltz bihurtuz;Gorri neutroa pH adierazlea da.Hartzitzen duen azukrearen azidoa sortzen duen kolonia gorria da eta hartzitzen ez den azukrearen kolonia koloregabea da.Salmonella koloregabea eta gardena da, erdigune beltzarekin edo gabe, eta Shigella koloregabea eta gardena da.
Argitalpenaren ordua: 2023-04-04