Polimerasaren kate-erreakzioa, honela laburtuaPCRingelesez, DNA zati zehatzak anplifikatzeko erabiltzen den biologia molekularreko teknika bat da.Gorputzaren kanpoko DNAren erreplikazio berezitzat har daiteke, eta horrek asko handitu dezake DNA kopuru txiki bat.Osoan zeharPCRerreakzio-prozesuan, substantzia-klase batek ezinbesteko papera betetzen du - entzimak.
1. Taq DNA
Hasierako esperimentuetanPCR, zientzialariek Escherichia coli DNA polimerasa I erabili zuten, Baina entzima honekin arazo bat dago: ziklo bat egiten den bakoitzean entzima berria berritu behar du, eta horrek eragiketa-urratsak apur bat zailtzen ditu eta zaila da guztiz automatikoki anplifikatzea.Arazo hau 1988an zientzialariek Thermus aquaticusetik Taq DNA polimerasa ustekabean isolatu ostean konpondu zen. Orduz geroztik, DNAren anplifikazio automatikoa errealitate bihurtu da.Entzima honen aurkikuntzak ere egiten duPCRteknologia teknologia erosoa, praktikoa eta unibertsala.Gaur egun, Taq DNA polimerasa DNA kitetan ohikoena den polimerasa da.
2. PfuDNA
Goian esan bezala, Taq DNasak akats handi bat du, beraz, zientzialariek Taq DNA polimerasa aldatu dute neurri batean, desadostasunaren ondorioz anplifikazio ez-espezifikoa ekiditeko, probaren emaitza okerrak eraginez.Baina Taq DNA polimerasaren aldaketak DNA polimerasaren jarduera galarazi dezake giro-tenperaturan.PfuDNA polimerasak ondo konpon ditzake Taq DNA polimerasaren aurreko desabantailak, beraz, PCR erreakzioa normaltasunez burutu daiteke eta xede-genearen anplifikazioaren arrakasta-tasa modu eraginkorrean hobetu daiteke.
3. Alderantzizko transkriptasa
Alderantzizko transkriptasa 1970ean aurkitu zen. Entzima honek RNA erabiltzen du txantiloi gisa, dNTP substratu gisa, base parekatzearen printzipioari jarraitzen dio eta RNA txantiloiaren osagarri den DNA kate bakar bat sintetizatzen du 5′-3′ norabidean.Alderantzizko transkriptasa ADN edo RNA txantiloien ADN polimerasaren jardueraren menpe dago batez ere eta, beraz, ez du 3′-5′ exonukleasa jarduerarik.Hala ere, RNasa H jarduera du, eta horrek alderantzizko transkriptasaren sintesiaren luzera mugatzen du neurri batean.Alderantzizko transkriptasa basatiaren fideltasun eta termoegonkortasun baxuaren ondorioz, zientzialariek ere aldatu egin zuten.
Izan erePCResperimentuak, kontsumigarri nagusiak hauek dira: PCR hodi indibidualak, 4/8 bandako PCR hodiak, PCR plakak.
LabiorenaPCR kontsumigarriakhonako hauek izanabantailak:
PCR plakak: Ziklogailu termikoen bateragarritasun zabala;Kontraste handiko, ondo identifikatzeko erraza;ondo fluoreszentzia islada;onabero-transferentzia;Ziurtatutako DNasa, RNasa, DNA, PCR inhibitzaileak eta pirogenorik gabeko probatua.
PCR hodi indibidualak: Lurruntzearekiko erresistentea;onabero-transferentzia;Argitasun optiko bikaina; DNasa, RNasa, DNA, PCR inhibitzaileak eta pirogenorik gabeko probak.
4/8 bandako PCR hodiak: Horma ultrameheak;argitasun handikoak;fluoreszentziaren isla ona;farmazia industrian, elikagaien industrian eta biologia molekularrean erabil daiteke; kalitate handiko PP material birjina; DNasa, RNasa, DNA, PCR inhibitzaileak eta pirogenorik gabeko probak egiaztatuta.
Argitalpenaren ordua: 2023-09-09